В настоящее время около 80% случаев цирроза печени в индустриальных странах прямо или косвенно обусловлены алкоголем. Употребление алкогольных напитков, эквивалентное 40-80 г этанола в сутки, на протяжении 10-12 лет приводит к развитию алкогольной болезни печени (АБП) [1], которая включает в себя стеатоз, стеатогепатит, цирроз и гепатоцеллюлярную карциному. Почти все клинические формы АБП сопровождаются развитием фиброза печени в результате персистирующего воспаления, индуцированного этанолом. В ответ на воздействие алкоголя и его метаболитов высвобождается целый каскад цитокинов, запускающих процессы воспаления, фиброгенеза и фибролиза, что приводит к избыточному накоплению внеклеточного коллагена [2]. К основным цитокинам, участвующим в ремоделировании внеклеточного матрикса, относятся интерлейкин-6 (ИЛ-6), ИЛ-8 и фактор некроза опухоли-α (ФНО-α). Они выделяются после употребления алкоголя и стимулируют образование острофазных белков гепатоцитами, увели чивают экспрессию провоспалительных цитокинов в макрофагах [3,4], вызывают нейтрофилию и инфильтрацию нейтрофилами печени [5,6].
Ремоделирование ткани печени в процессе воспаления и фиброза сопровождается портальной гипертензией, в основе которой лежит внутри- и внепеченочная дисфункция эндотелия [7,8]. Надежным маркером повре ждения эндотелия считают растворимую молекулу межклеточной адгезии (sICAM-1), эндотелин-1 (ЭТ-1), сосудистый эндотелиальный фактор роста-А (VEGF-A). Эти факторы, вероятно, участвуют в изменении внутрипеченочной микроциркуляции и ангиогенезе при гипоксии и воспалении [9,10]. В табл. 1 представлены маркеры воспаления, эндотелиальной дисфункции (ЭД) и гены, участвующие в иммуновоспалительных изменениях при фиброзе печени.
Маркер | Функции | Ген |
---|---|---|
ИЛ-6 | Один из важнейших медиаторов острой фазы воспаления. Высвобождается после употребления алкоголя. Стимулирует дифференцировку В- и Т-клеток, образование антител, выработку острофазных белков гепатоцитами, увеличивает экспрессию провоспалительных цитокинов в макрофагах и уменьшает некроз-ассоциированное воспаление в гепатоцитах за счет предотвращения гибели эндотелиальных клеток синусоидных сосудов и улучшения микроциркуляции [4,20] | Ген ИЛ-6 расположен на хромосоме 7p21. Полиморфизм rs1800795 ассоциирован с уровнем ИЛ-6 [18,19] |
ИЛ-8 | Провоспалительный хемокин подсемейства СХС, который синтезируется макрофагами, эпителиальными, эндотелиальными клетками, гепатоцитами. Вызывает хемотаксис нейтрофилов и инфильтрацию ими печени [20]. | Ген ИЛ-8 расположены в коротком плече 4 хромосомы. Полиморфизм rs4073 ассоциирован с АБП [21] |
ФНО-α | Медиатор воспаления, пролиферации клеток и апоптоза. Участвует в развитии воспалительной реакции при остром и хроническом гепатите. Способствует экспрессии других цитокинов и молекул адгезии, которые опосредуют активацию иммунных клеток, участвующих в гибели гепатоцитов [23] | Ген ФНО-α расположен на хромосоме 6p21.3 внутри главного комплекса гистосовместимости. Полиморфизм rs1800629 ассоциирован с тяжестью различных заболеваний печени [22] |
ICAM-1 | Трансмембранный белок типа I, который экспрессируется на синусоидальных эндотелиальных клетках в печени, способствует миграции нейтрофилов и моноцитов, ассоциирован с тяжестью заболевания печени [24,25] | Ген ICAM-1 расположен на хромосоме 19 p13.2-p13.3. Полиморфизм rs281437 ассоциирован с фиброзом печени [25,26] |
ЭТ-1 | Оказывает вазоконстрикторное и митогенное действие, положительное инотропное и хронотропное действие, стимулирует симпатическую и ренин-ангиотензин-альдостероновую системы и модифицирует гомеостаз. Уровень повышается при заболеваниях печени [27] | Ген ЭТ-1 состоит из 6836 нуклеотидов, расположенных на хромосоме 6p23-p24. Полиморфизм rs1800541 у пациентов с АБП не изучался [28] |
VEGF-A | Эндогенный митоген и индуктор ангиогенеза. Экспрессируется в эндотелиальных клетках, гепатоцитах, звездчатых клетках. Способствует ангиогенезу и прогрессированию фиброза печени [30] | Ген VEGF расположен на хромосоме 6p21.3. Полиморфизм rs699947 при заболеваниях печени не изучали [28,29] |
В последнее время большое значение придается изучению генетических факторов, влияющих на цитокиновый профиль и концентрации маркеров эндотелиальной дисфункции, у пациентов с АБП [10,11]. В отдельных работах определяли частоту полиморфизма различных генов цитокинов и маркеров эндотелиальной дисфункции при алкоголизме и АБП [12-15]. Однако работ, посвященных изучению связи концентраций маркеров с аллельными вариантами полиморфных локусов их генов, недостаточно [16,17].
Целью исследования было изучение иммуновоспалительных и генетических факторов, участвующих в развитии фиброза печени у пациентов, злоупотребляющих алкоголем.
В исследование включали пациентов с алкогольной болезнью печени, проходивших лечение в ГКБ №64 г. Москвы или наблюдающихся амбулаторно в Национальном научном центре наркологии г. Москвы (филиал ФГБУ НМИЦ ПН МЗ РФ им. В.П. Сербского). Исследование одо брено этическим комитетом при ФГАОУ ВО Россий ский университет дружбы народов (№21 от 21.04.2017).
Критериями хронической алкогольной интоксикации служили признание злоупотребления алкоголем самим пациентом и/или его родственниками, а также позитивные ответы на опросники САGЕ и AUDIT [31,32]. Из исследования исключали пациентов с антителами к вирусам гепатита, пациентов с хроническими заболеваниями печени неалкогольной этиологии, острым алкогольным гепатитом, повышением активности аминотрансфераз более чем 5 раз по сравнению с верхней границей нормы [32].
Стадию фиброза печени (F) определяли методом непрямой эластометрии с помощью аппарата "Фиброскан" (Франция): F0 – плотность печени до 5,8 кПа, F1 – от 5,9 до 7,2 кПа, F2 – от 7,3 до 9,5 кПа, F3 – от 9,6 до 12,5 кПа, F4 (цирроз) – более 12,5 кПа [36].
Содержание маркеров эндотелиальной дисфункции и цитокинов определяли через 7 дней после поступления в стационар на фоне гарантированной абстиненции в лаборатории биохимии Национального научного центра наркологии. Содержание ИЛ-6, VEGF-A, sICAM-1 и ФНО-α в сыворотке крови измеряли с помощью коммерческих ИФА-наборов Bender MedSystems (Австрия), ИЛ-8 – Invitrogen (США), ЭТ-1 – Biomedica (Австрия). В качестве референсных значений использовали концентрации маркеров, измеренные у 15 здоровых доноров, согласно рекомендациям производителей.
Из цельной крови выделяли тотальную ДНК на колонках с помощью набора реагентов "К-Сорб" (#EX-514, Синтол, Россия). Аллельные варианты полиморфных локусов определяли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, используя термоциклер АНК48 (Институт аналитического приборостроения РАН, Россия). Использовали наборы реактивов для определения однонуклеотидных полиморфизмов ФНО-α (rs1800629), ИЛ-6 (rs1800795), VEGF-A (rs699947) ("SNP-Скрин" #NP465-100, NP-512-100, NP-454-100 и NP-453-100, соответственно, Синтол, Россия) и ICAM-1 (rs281437), ЭТ-1 (rs1800541), ИЛ-8 (rs4073) (#4351379, Thermo Fisher Scientific, США).
Статистический анализ проводился с использованием программного обеспечения Statistica (8.0 для Win dows). С учетом малого размера выборки и проведенных тестов (критерии Колмогорова-Смирнова, Шапиро-Уилка, ящичная гистограмма) большинство показателей считали распределенными ненормально. Стати сти ческую достоверность различий между группами оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Корреля цион ный анализ проводили с помощью метода Спирмена. Для сравнения частоты аллелей и генотипов исследуемых признаков использовали таблицы сопряженности и критерий c2 с поправкой Йейтса при ожидаемых частотах более 10 и точный критерий Фишера при ожидаемых частотах менее 10. Расчет количественной оценки влияния непрерывных и дискретных факторов на бинарный параметр проводился с помощью логистического регрессионного анализа с расчетом отношения шансов (ОШ). Стати сти чески значимыми считали результаты при p<0,05.
В исследование были включены 46 пациентов с АБП (средний возраст 50,2±11,5 лет, 35 мужчин), злоупотребляющих алкоголем в течение в среднем 15,6±9,6 лет. Пациенты были раcпределены на группы с низкой (F0+F1) и высокой (F3+F4) степенью фиброза печени. Больных с F2 выявлено не было. Группы были сопоставимы по возрасту, полу, индексу массы тела и алкогольному анамнезу (табл. 2). У пациентов с более выраженным фиброзом печени отмечались желтуха и асцит, были выше уровни С-реактивного белка (СРБ), билирубина и ниже МНО, протромбиновый индекс, уровни альбумина и активность холинэстеразы (табл. 3)
Показатель | 1-я группа (n=10) | 2-я группа (n=36) |
---|---|---|
Примечание: *p<0,01 между группами (U-критерий Манна-Уитни) | ||
Возраст, лет | 48,9±13,4 | 51,3±11,1 |
Мужчины, n (%) | 7 (70,0) | 28 (77,8) |
Степень фиброза (F), n (%) | ||
0 | 7 (70,0) | 0 |
1 | 3 (30,0) | 0 |
2 | 0 | 0 |
3 | 0 | 2 (5,6) |
4 | 0 | 34 (94,4) |
Плотность печени, кПа | 4,5 | 60,5 |
[3,1;5,5] | [15,4;75,0]* | |
Индекс массы тела, кг/м2 | 31,1±7,9 | 26,1±4,4 |
Употребление алкоголя (лет) | 18,5±9,4 | 15,5±9,6 |
Число полож. ответов по тесту САGЕ | 3,2±0,7 | 3,5±0,5 |
Число полож. ответов по тесту AUDIT | 20,8±5,7 | 22,6±4,0 |
Желтуха, n (%) | 0 | 12 (34,3) |
Диаметр воротной вены, мм | 11,0 [11;12] | 13,0 [12;14]* |
Асцит, n % | 0 | 26 (72,2) |
Смерть, (n)% | 0 | 3 (8,3) |
Уровни цитокинов и маркеров эндотелиальной дисфункции. Концентрации ИЛ-6 и ИЛ-8 превышали референсные значений у пациентов обеих групп и во 2-й группе были достоверно выше, чем в 1-й группе. Выявлена прямая корреляция между содержанием ИЛ-6 и ИЛ-8 и плотностью печени, которую измеряли с помощью эластометрии. Концентрация ФНО-α была выше референсных значений у пациентов обеих групп, однако она достоверно не отличалась между группами и не коррелировала с плотностью печени (табл. 4).
Показатель | 1-я группа (n=10) | 2-я группа (n=36) |
---|---|---|
Примечание: *p<0,05, **p<0,01 между группами (U-критерий Ман на-Уитни) | ||
Гемоглобин, г/л | 145,0[122,0;160,0] | 110,0 [94,0;128,5]** |
Лейкоциты, тыс/мкл | 7,8 [7,2;8,7] | 6,9 [5,2;8,7] |
Тромбоциты, тыс/мкл | 188,0 [134,0;334,0] | 168,0 [139,0;253,0] |
СОЭ, мм/ч | 15,0 [12,0;35,0] | 34,5 [10,0;49,0] |
С-реактивный белок, мг/л | 2,1 [2,0;2,1] | 13,4 [9,4;46,0]* |
АЛТ, Ед/л | 31,2 [18,0;74,0] | 30,4 [17,1;58,8] |
АСТ, Ед/л | 39,0 [22,5;58,1] | 71,1 [39,6;152,5] |
Гамма-ГТ, Ед/л | 57,0 [39;105] | 274,0 [104;409]** |
Билирубин, мкмоль/л | ||
общий | 11,2 [9,1;23,4] | 51,0 [15,4;162,4]* |
прямой | 2,9 [1,8;8,3] | 27,7 [6,0;88,4]* |
Щелочная фосфатаза, Е/л | 89,0 [50,5;372,5] | 165,0 [112,3;203,0] |
Общий белок, г/л | 75,0 [57,9;77,1] | 68,3 [58,4;75 |
Альбумин, г/л | 38,9 [38,4;40,0] | 24,4 [22,2;32,3]** |
Холестерин, ммоль/л | 4,6 [3,1;5,0] | 3,9 [2,9;4,9] |
Холинэстераза, Ед/л | 5,5 [4,1;6,1] | 2,35 [1,9;3,5]* |
Протромб. индекс, % | 92,5 [77,0;100] | 58,0 [38,5;77,5]* |
МНО, МЕ/мл | 1,1 [1,0;1,2] | 1,6 [1,2;1,9]* |
Креатинин, мкмоль/л | 84,5 [77,0;107,0] | 77,0 [60,0;103,0] |
Мочевина, ммоль/л | 5,8 [5,3;7,3] | 4,2 [2,6;6,2] |
Фолиевая кислота, нг/мл | 4,9 [4,8;6,0] | 4,3 [3,4;5,3] |
Уровни VEGF-А и sICAM-1 в обеих группах превышали референсные значения. Концентрация sICAM у пациентов 2-й группы была достоверно выше, чем в 1-й группе, и прямо коррелировала с плотностью печени, в то время как достоверных отличий уровней VEGF-A между двумя группами не выявили. Уровень ЭT-1 был повышен только у пациентов с выраженным фиброзом, однако его концентрация ассоциировалась с плотностью печени (табл. 4).
Показатели | Референсные значения | 1-я группа (n=10) | 2-я группа (n=36) | r (p<0,05) |
---|---|---|---|---|
Примечание: *р<0,05 между двумя группами (U-критерий Манн-Уитни). r – коэф. корреляции Спирмана с плотностью печени (p<0,05) | ||||
ИЛ-6, пг/мл | 0,5±0,2 | 2,4 [1,2:2,8] | 13,0 [3,1;26,0]* | 0,60 |
ИЛ-8, пг/мл | 0,4±0,3 | 1,6 [0,0;5,9] | 30,7 [12,4;80,5]* | 0,77 |
ФНО-α, пг/мл | 0,10±0,06 | 0,22 [0,22;0,24] | 0,27 [0,22;0,29] | - |
VEGF-A, пг/мл | 273,6±38,0 | 746,8 [354,2;1827,2] | 996,4 [428,6;1572,4] | - |
sICAM-1, нг/мл | 311±27 | 469 [288;645] | 1120 [621;1569]* | 0,58 |
ЭТ-1, фмоль/мл | 1,2±0,2 | 0,0 [0;0,2] | 1,5 [0,5;2,8]* | 0,56 |
Генетические детерминанты иммуновоспалительных реакций и фиброгенеза. Аллельные варианты полиморфных локусов были определены у 43 из 46 пациентов, в том числе у всех 10 больных 1-й группы и 33 из 36 пациентов 2-й группы. Достоверной разницы в распределении генотипов и/или накоплении аллелей генов, кодирующих ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-α, VEGF-A, ICAM-1, ЭТ-1, между двумя группами не выявлено (табл. 5). Ассоциация между аллельными вариантами полиморфных локусов генов ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-α, ЭТ-1 и концентрацией маркеров также отсутствовала. В то же время как в 1-й, так и 2-й группе концентрация VEGFA у пациентов с генотипом СА локуса rs699947 2578C>A была достоверно выше, чем у пациентов с генотипом AA (1-я группа: 2100,7 [1129,0-3346] и 316,0 [267,4364,6] пг/мл, соответственно; р=0,04; 2-я группа: 1360,0 [747,4-1698,0] и 364,0 [267,4-412,6] пг/мл; р=0,01). У гомозигот по аллелю А концентрации VEGF-A в обеих группах были ниже, чем у гетерозигот. Кроме того, во 2-й группе генотип ТТ локуса ICAM-1 rs281437 -451C>T ассоциировался с более высоким уровнем sICAM-1 по сравнению таковым у больных с генотипом СС (1686,0 [1672-1700] и 987,2 [303-1726] пг/мл, соответственно; р=0,05) (табл. 5).
Генотипы | 1-я группа (n=10) | 2-я группа (n=33) | ||
---|---|---|---|---|
n (%) | Уровень маркера | n (%) | Уровень маркера | |
Примечание: *р<0,05 внутри группы. Уровни ИЛ-6, ИЛ-6, ФНО-α и VEGF-A приведены в пг/мл, sICAM-1 – в нг/мл, ЭТ-1 – в фмоль/м | ||||
ИЛ-6 rs1800795 C174G | ||||
CG | 10 (100) | 2,6 [2,1-2,8] | 20 (64,5) | 11,2 [3,4-26,0] |
CC | 0 | - | 7 (22,6) | 11,6 [2,4-34,4] |
GG | 0 | - | 4 (12,9) | 8,0 [1,9-13,6] |
С | 10 (50,0) | 2,6 [2,1-2,8] | 34 (54,8 | 11,5 [2,7-26,0] |
G | 10 (50,0) | 2,6 [2,1-2,8] | 28 (45,2) | 9,8 [2,0-14,6] |
ИЛ-8 rs4073 -352A/T | ||||
АТ | 8 (80) | 4,4 [1,5-7,5] | 18 (56,3) | 39,4 [5,3-69,1] |
ТТ | 2 (20) | 0,0 | 9 (28,1) | 20,7 [12,4-228,8] |
AA | 0 | - | 5 (15,6) | 14,1 [8,8-294,1] |
Т | 12 (60,0) | 4,4 [1,5-7,5] | 36 (56,0) | 28,5 [8,9-161,3] |
A | 8 (40,0) | 4,4 [1,5-7,5] | 28 (43,7) | 23,4 [8,1-175,3] |
ФНО-α rs1800629 4682G/A | ||||
GA | 3 (20,0) | 0,21 [0,19-0,23] | 6 (18,8) | 0,29 [0,2-0,38] |
GG | 6 (60,0) | 0,22 [0,21-0,23] | 26 (81,2) | 0,26 [0,21-0,29] |
AA | 1 (20,0) | 0,0 | 0 | - |
G | 15 (83,3) | 0,22 [0,20-0,23] | 58 (90,6) | 0,25 [0,20-0,31] |
A | 5 (16,7) | 0,21 [0,19-0,23] | 6 (9,4) | 0,29 [0,20-0,38] |
VEGF-A rs699947 C2578A | ||||
СA | 6 (60,0) | 2100,7 [1129,0-3346,0]* | 15 (46,9) | 1360,0 [747,4-1698,0]* |
АА | 4 (40,0) | 316,0 [267,4-364,6]* | 8 (25,0) | 364,0 [267,4-412,6]* |
СС | 0 | - | 9 (28,1) | 914,2 [429,3-1426,8] |
С | 6 (30,0) | 2100,7 [1129,0-3346,0] | 33 (51,6) | 1118,1 [667,2-1611,2] |
А | 14 (70,0) | 1461,5 [967,6-2649,2] | 31 (48,4) | 960,5 [747,1-1488,0] |
ICAM-1 rs281437 -451C>T | ||||
СТ | 4 (40,0) | 428,7 [212,0-645,0] | 10 (31,3) | 1242,7 [621,0-1569,0] |
СС | 6 (60,0) | 408, 7 [288,0-521,0] | 20 (62,5) | 987,2 [560,0-1544,0]* |
ТТ | 0 | - | 2 (6,2) | 1686,0 [1672,0-1700,0]* |
С | 16 (80,0) | 412,4 [244,0-361,2] | 50 (78,1) | 1087,2 [560,0-1544,0] |
Т | 4 (20,0) | 428,7 [212,0-645,0] | 14 (21,9) | 1287,4 [961,5-1664,1] |
ЭТ-1 rs1800541 -1644T>G | ||||
TG | 6 (60,0) | 0,4 [0,0-1,1] | 9 (28,1) | 1,9 [0,7-2,8] |
TT | 4 (40,0) | 0,1 [0,0-0,2] | 23 (71,9) | 1,5 [0,0-2,7] |
GG | 0 | - | 0 | - |
G | 6 (30,0) | 0,36 [0,0-1,1] | 9 (28,1) | 1,9 [0,7-2,8] |
T | 14 (70,0) | 0,16 [0,0-0,9] | 55 (71,9) | 1,5 [0,4-2,7] |
Таким образом, у пациентов с АБП были повышены концентрации всех исследованных цитокинов и маркеров эндотелиальной дисфункции. Содержание ИЛ-6, ИЛ-8, sICAM-1 и ЭТ-1 зависело от стадии фиброза печени и в большей степени увеличивалось при тяжелом фиброзе (F3-4). В предыдущих исследованиях концентрации ИЛ-6 и ИЛ-8 увеличивались у пациентов с АБП, у которых отсутствовали клинические признаки заболевания [20], и/или нарастали по мере прогрессирования поражения печени [35]. В нашем исследовании также выявлена корреляция между содержанием ИЛ-6 и ИЛ-8 и плотностью печени. Провоспалительный цитокин ИЛ-8 ранее изучался у пациентов с различными заболеваниями печени, в частности при алкогольном гепатите наблюдалось значительное повышение его уровня, а при циррозе печени – умеренное повышение [23,36]. В другом исследовании у 90 пациентов, злоупотребляющих алкоголем, концентрация ИЛ-8 была выше, чем у здоровых добровольцев (n=15), причем повышение содержания цитокина не зависело от тяжести поражения печени [35]. В нашем исследовании значительное повышение уровня ИЛ8 наблюдалось только у пациентов с выраженным фиброзом печени.
Повышение уровня ФНО-α в сыворотке ранее было описано у пациентов с АБП [38]. ФНО-α вызывает активацию различных цитокинов, способствуя прогрессированию фиброза печени, а концентрация его при циррозе печени, в том числе компенсированном и декомпенсированном, выше, чем у здоровых людей [20]. При острой декомпенсации печеночной функции отмечалась обратная корреляция содержания ФНО-α с тяжестью заболевания печени [38]. Наши результаты частично согласуются с данными литературы. У пациентов с АБП мы выявили повышение уровня ФНО-α по сравнению с референсными значениями, однако при прогрессировании фиброза печени достоверного увеличения концентрации цитокина не отмечено.
Маркеры эндотелиальной дисфункции у пациентов с заболеваниями печени изучены в меньшей степени, чем цитокины. Концентра ция их в сыворотке повышалась при длительном употреблении алкоголя [39], остром алкогольном гепатите и циррозе печени [40]. В нашем исследовании значительное увеличение содержания sICAM-1 наблюдалось только у больных с тяжелым фиброзом печени (F3-4).
Повышение уровня VEGF-A от ме чено при злоупотреблении алкоголем и различных стадиях заболевания печени [41,42]. Наши результаты согласуются с данными литературы, свидетельствующими о том, что концентрация VEGF-A не зависит от стадии фиброза печени.
Содержание ЭТ-1 также повышалось у пациентов с АБП и коррелировало с прогрессированием фиброза и портальной гипертензией [43]. В нашем исследовании повышение уровней ЭТ-1 отмечалось при тяжелом фиброзе печени и коррелировало с плотностью печени. Прямая корреляция маркеров воспаления (ИЛ-6, ИЛ-8) и эндотелиальной дисфункции (sICAM-1, ЭТ-1) с плотностью печени, выявленная в нашем исследовании, соответствует данным других авторов [20,36,40,43].
В литературе описана ассоциация аллеля Т локуса rs281437-451C>T гена ICAM-1 с тяжестью фиброза и прогрессированием фиброза печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С [24,44,45]. В нашем исследовании генотип ТТ ассоциировался с более высокими уровнями sICAM-1 в группе пациентов с АБП и выраженным фиброзом печени. Однако частота аллелей и генотипов не отличалась между двумя группами пациентов. Локус rs699947 2578C>A гена VEGF-A ранее изучали у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями, болезнями почек и кожи. Были выявлены ассоциации экспрессии локуса с более высокими уровнями VEGF-A [46-48]. В нашем исследовании генотип СА ассоциировался с более высоким уровнем VEGF-A по сравнению с таковым при генотипе АА у пациентов как с выраженным, так и незначительным фиброзом печени. При этом у гомозигот по аллелю А концентрации VEGF-A в обеих группах были ниже, чем у гетерозигот.
Локус rs1800795 174C>G гена ИЛ-6 изучали у пациентов с неалкогольными заболеваниями печени и АБП. Ассоциации между аллелем С и генотипами по аллелю С с риском развития неалкогольной жировой болезни печени наблюдали у пациентов в российской и других популяциях [49,50], а также на фоне носительства вируса гепатита С [14], в то время как с АБП в разных исследованиях связей не обнаружено [51,52]. В нашем исследовании не было выявлено достоверной разницы уровней ИЛ-6 у носителей различных генотипов и аллелей, а частота их была сопоставимой у пациентов с низкой и высокой степенью фиброза печени.
Локус rs4073 -352A/T гена ИЛ-8 у пациентов с заболеваниями печени ранее не изучался. В нашем исследовании достоверных ассоциаций вариантов аллелей и генотипов с уровнем ИЛ-8 и их различий по частоте между двумя группами обнаружено не было.
Установлено, что гомозиготность по аллелю G локуса rs1800629 гена ФНО-α и и однонуклеотидная последовательность 4682 G/A у пациентов с вирусным гепатитом и циррозом печени ассоциируется с повышенными уровнями ФНО-α и тяжестью заболевания [53-55]. По нашим данным, у пациентов с АБП ассоциаций с уровнем ФНО-α и различий по частоте аллелей и генотипов между пациентами с легким и выраженным фиброзом печени не выявлено.
У пациентов с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и сахарным диабетом полиморфизм гена ЭТ-1 rs1800541 -1644T>G ассоциировался с риском развития и тяжестью заболевания [56,57]. В нашем исследовании связи полиморфизма rs1800541 -1644T>G с уровнем ЭТ1 выявлено не было, а частота генотипов и аллелей не отличалась у пациентов с различной выраженностью фиброза печени.
У пациентов с АБП отмечено повышение уровней маркеров воспаления и эндотелиальной дисфункции, особенно при наличии выраженного фиброза печени. Выявлена прямая корреляционная связь уровней провоспалительных цитокинов (ИЛ-6 и ИЛ-8) и маркеров эндотелиальной дисфункции (ЭТ-1, sICAM-1) с выраженностью фиброза печени. Носительство генотипа СА локуса rs699947 C2578A гена VEGF-A ассоциировалось с высоким уровнем VEGF-A в крови у пациентов с АБП, а генотип ТТ локуса rs281437 -451C/T гена ICAM-1 у пациентов с выраженным фиброзом печени сопровождался повышением уровней sICAM-1.